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培養基教您誘導細胞融合的主要方法
更新時間:2014-08-06   點擊次數:1175次

培養基教您誘導細胞融合的主要方法

  兩個或兩個以上的細胞培養基合并成一個雙核或多核細胞的現象稱為細胞融合,也稱細胞雜交,在自然情況下的受精過程即屬這種現象。

  誘導細胞培養基融合的主要方法有:病毒誘導融合,化學融合劑誘導融合和電融合。

  1. 病毒誘導融合:有許多種類的病毒能介導細胞培養基融合,zui常用的是滅活的仙臺病毒(HVJ),為RNA病毒。病毒誘導細胞融合的過程有:首先是細胞表面吸附許多病毒粒子,接著細胞發生凝集,幾分鐘至幾十分鐘后,病毒粒子從細胞表面消失,而就在這個部位鄰接的細胞的細胞膜融合,胞漿相互交流,zui后形成融合細胞。

  2. 化學融合劑誘導融合:化學融合劑主要有脂肪酸衍生物、脂質體、鈣離子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白質和多肽,其中zui常用的是聚已二醇(PEG)。PEG用于細胞融合至少有兩方面的作用:①可促使細胞凝結;②破壞互相接觸處的細胞膜的磷脂雙分子層,從而使相互接觸的細胞膜之間發生融合,進而細胞質溝通,形成一個打的雙核或多核融合細胞。

  3. 電融合:是指細胞培養基在電場中極化成偶極子,并沿著電力線排列成串,然后用高強度、短時程的電脈沖擊穿細胞膜而導致細胞融合。

  細胞培養基融合技術在基因定位、基因表達產物、腫瘤診斷核治療、生物新品種培育及單克隆抗體技術等領域有著非常廣泛的應用前景。單克隆抗體技術就是通過細胞融合技術發展起來的,在生命科學研究核應用方面產生了重大影響。 

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